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抗精子抗体测定

来源:郑州长江不孕不育医院 | 日期:2015-01-15 16:50 | [在线咨询] [预约挂号]
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郑州长江中医院专家介绍:怀孕是精子和卵子正常的结合后才能使女性受孕成功,如果没有高质量的精子,女性是不可能受孕的,目前很多人不育是由于身体上产生了抗精子抗体,在这里提醒大家要养成定期检查的习惯,那么抗精子抗体测定的方法是什么?

抗精子抗体的检测方法主要包括以下几个方面:

1、精子抗原制备:筛选收集精液常规检查正常的精液,用生理盐水反复离心洗涤,尽可能除去精浆,经超声波超声粉碎,10~15min高速离心,吸上清,测定上清液蛋白浓度,将蛋白浓度稀释为3.5~5.0μg/mL,为精子抗原溶液。太专业,看不懂,请直接点击咨询专家

2、加酶结合物:HRP-ProteinA以1∶640稀释,每孔加入100μL,置室温1h,同上洗涤。

3、反应板包被抗原:将人精子抗原稀释成3.5~5μg/mL,包被液加到聚氯乙烯微量测定板内,每孔100μL,置4℃ 冰箱过夜。

4、加待测样品:样品用PBS稀释100倍,每孔加入100μL,同时加 As-Ab血清及正常处女血清作分别阳性和阴性对照,置37℃温育1h,同上法洗涤。

5、封闭处理:次日早晨,倾去抗原溶液,用洗涤PBS洗3次,每次5min,每次洗涤后都要将板在纸上拍干,再加入1%的聚乙烯醇溶液200μL封闭,置室温1h后同上法洗涤。

6、结果判定:用酶标测定仪 490μm测其OD值,OD 值≥2.0时为阳性。

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